膠原檢測(cè)試劑盒

背景簡(jiǎn)介：

細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）是一種高度動(dòng)態(tài)且復(fù)雜的三維結(jié)構(gòu)，由膠原蛋白、糖胺聚糖（GAGs）、彈性蛋白、纖維連接蛋白及其他多種非細(xì)胞結(jié)構(gòu)的大分子網(wǎng)絡(luò)構(gòu)成。ECM的核心功能是為細(xì)胞提供穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境，盡管不同組織和器官對(duì)細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的需求存在差異，但膠原蛋白始終是ECM的主要構(gòu)成成分。作為哺乳動(dòng)物體內(nèi)豐富的蛋白質(zhì)家族，膠原蛋白約占蛋白質(zhì)總質(zhì)量的30%，它不僅是結(jié)締組織的主要組成部分，更在風(fēng)濕性疾病的炎癥進(jìn)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。癌癥、缺氧、遺傳性疾病、炎癥和衰老等因素均可調(diào)節(jié)膠原蛋白的合成。

為研究結(jié)締組織及其組分的生理性和病理性代謝，Chondrex公司推出系列檢測(cè)試劑盒：包括定量多種物種I型和II型膠原的ELISA試劑盒 、總膠原檢測(cè)試劑盒 、糖胺聚糖（GAGs）檢測(cè)試劑盒、DNA檢測(cè)試劑盒以及適用于組織和細(xì)胞培養(yǎng)樣本的代謝定量分析試劑盒。

產(chǎn)品描述：

1.I型膠原檢測(cè)試劑盒

I型膠原是豐富的膠原類型，存在于大多數(shù)結(jié)締組織中，如皮膚、骨骼、肌腱、韌帶、心臟和肺部 。被深入研究的I型膠原蛋白紊亂是纖維化，其標(biāo)志是膠原沉積的增加 Chondrex, I提供針對(duì)九種不同物種的I型膠原蛋白檢測(cè)ELISA試劑盒，包括用于檢測(cè)I型膠原C端端肽（C-Telopeptide）和N端端肽（N-Telopeptide）的試劑盒。

2. 小鼠/人C端肽（CTX-I）及N端肽（NTX-I）檢測(cè)ELISA試劑盒

小鼠/人類C端肽（CTX-I）及N端肽（NTX-I）檢測(cè)ELISA試劑盒：CTX-I（競(jìng)爭(zhēng)性ELISA法）與NTX-I（夾心ELISA法）檢測(cè)試劑盒專用于定量降解的I型膠原蛋白肽片段。蛋白酶介導(dǎo)骨骼中I型膠原蛋白的吸收過程，并產(chǎn)生特定的膠原降解肽片段。例如，基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）特異性從I型膠原蛋白C端產(chǎn)生降解片段（ICTP），而組織蛋白酶K則從I型膠原蛋白的C端產(chǎn)生CTX-I片段、從N端產(chǎn)生NTX-I片段。這些膠原降解片段反映了I型膠原蛋白的代謝狀態(tài)，并可指示多種疾病狀態(tài)下的蛋白酶活性。因此，通過免疫檢測(cè)方法監(jiān)測(cè)生物體液中這些降解片段的水平已成為重要手段。Chondrex公司利用可識(shí)別物種間保守肽序列的單克隆抗體，開發(fā)了適用于小鼠和人類樣本的CTX-I與NTX-I檢測(cè)ELISA試劑盒。

3. II型膠原檢測(cè)試劑盒

II型膠原蛋白其組織分布僅限于無血管組織（如軟骨和眼睛玻璃體）。由于II型膠原蛋白能在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中誘發(fā)關(guān)節(jié)炎，在人某些自身免疫性疾?。ㄈ珙愶L(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）、與RA相關(guān)的眼部疾病以及影響含II型膠原特定組織的復(fù)發(fā)性多軟骨炎）的發(fā)病機(jī)制中，II型膠原蛋白的自身免疫反應(yīng)起到作用。II型膠原蛋白檢測(cè)ELISA試劑盒旨在定量檢測(cè)多種物種（包括人、猴、豬、牛、大鼠、小鼠、兔、馬和雞）的細(xì)胞/組織培養(yǎng)物和組織樣本中的天然II型膠原蛋白含量。

該試劑盒對(duì)天然形式（未變性）膠原蛋白具有高度特異性，同時(shí)對(duì)變性膠原蛋白的反應(yīng)性較低。因此，在制備用于該檢測(cè)的組織樣本時(shí)，必須采用特殊的膠原蛋白溶解方案以防止膠原蛋白變性。

4.羥脯氨酸檢測(cè)試劑盒（檢測(cè)總膠原蛋白）

羥脯氨酸檢測(cè)試劑盒用于定量檢測(cè)組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)物和組織培養(yǎng)物中的總膠原蛋白含量（任何類型和物種）。羥脯氨酸作為膠原蛋白的主要組成成分，約占其氨基酸總量的13.5%。由于羥脯氨酸在膠原蛋白和彈性蛋白中的分布高度特異性，其含量通常可反映樣品中的膠原蛋白總量。因此，通過定量羥脯氨酸來評(píng)估組織纖維化或膠原沉積程度已成為常用方法。傳統(tǒng)羥脯氨酸檢測(cè)方法需要繁瑣的操作流程和特殊工具。相比之下，Chondrex公司推出的羥脯氨酸檢測(cè)試劑采用經(jīng)過優(yōu)化的檢測(cè)系統(tǒng)，可在96孔板上輕松精準(zhǔn)地完成操作。該檢測(cè)方法適用于天然膠原和變性膠原的總含量測(cè)定。樣品無需進(jìn)行膠原溶解處理，但檢測(cè)前必須進(jìn)行水解步驟。通過水解處理，可從總膠原樣品中解離出游離羥脯氨酸。

5. 天狼猩紅總膠原檢測(cè)試劑盒（檢測(cè)可溶性總膠原蛋白）

天狼猩紅總膠原檢測(cè)試劑盒采用天狼猩紅染料作為檢測(cè)試劑，用于測(cè)定樣品中可溶性膠原蛋白濃度。該染料能特異性結(jié)合纖維狀膠原（I-V型）的[Gly-X-Y]n螺旋結(jié)構(gòu)。本試劑盒無法區(qū)分膠原蛋白種類與類型，適用于檢測(cè)樣品中的總膠原含量。由于細(xì)胞培養(yǎng)基中膠原含量較低，若檢測(cè)對(duì)象為細(xì)胞培養(yǎng)基樣本，可能需進(jìn)行額外濃縮步驟。

本試劑盒僅可檢測(cè)樣品中的可溶性天然（未變性）膠原蛋白。若研究需區(qū)分天然與變性膠原蛋白，可采用羥脯氨酸檢測(cè)法測(cè)定總膠原含量—天然膠原（天狼猩紅法）與總膠原（羥脯氨酸法）的差值即為變性膠原水平。標(biāo)準(zhǔn)版試劑盒需搭配分光光度計(jì)使用，而96孔板式天狼猩紅膠原檢測(cè)試劑盒專為酶標(biāo)板設(shè)計(jì)，可同步檢測(cè)多種含膠原樣本（組織標(biāo)本、細(xì)胞培養(yǎng)基、培養(yǎng)細(xì)胞），操作時(shí)間僅需30-60分鐘（視樣本數(shù)量而定），檢測(cè)波長(zhǎng)為540 nm。

6. 天狼猩紅總膠原染色試劑盒

天狼猩紅與固綠是一種聯(lián)合染色方案，可用于區(qū)分膠原蛋白與周圍組織成分。天狼星紅特異性結(jié)合纖維狀膠原的[Gly-X-Y]n螺旋結(jié)構(gòu)，而固綠則與非膠原蛋白結(jié)合。由于這兩種染料分別在540 nm和605 nm波長(zhǎng)處具有特征吸收峰，通過測(cè)定提取染料的吸光度值即可計(jì)算出樣品中膠原蛋白與非膠原蛋白的含量。Chondrex公司利用這兩種染料的性質(zhì)，開發(fā)出可同步檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞層和組織切片中膠原蛋白與非膠原蛋白含量的半定量檢測(cè)試劑盒。該檢測(cè)法無需膠原蛋白溶解步驟，可直接測(cè)量各種組織中的總膠原含量。檢測(cè)結(jié)果可通過固綠染色OD值對(duì)非膠原蛋白進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化校正。對(duì)于厚度10-20μm的常規(guī)組織切片，該檢測(cè)對(duì)膠原蛋白和非膠原蛋白的靈敏度分別可達(dá)3μg/切片和50μg/切片。試劑盒所含試劑可滿足30-50個(gè)樣本的染色需求。

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